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Live cell 내 Copper(I) ion 이미징

Specific detection of copper(I) ion in living cells

■ 서론
Copper(I) ion 은 생체 내 필수적인 구성물질 중 하나인 미량금속입니다. 주로 cytochrome c, superoxide dismutase, 그리고 tyrosinase 등의 효소 활성을 위한 cofactor로 작용합니다. Copper(I) 은 구리이온이 세포 내 환경에서 일반적으로 존재하는 환원상태이며, CopperGREEN™ 은 이와 반응하여 형광을 나타냄으로써 live cell 상태에서도 Copper(I) 을 눈으로 관찰하기 용이하도록 개발된 chemical probe 입니다.

■ 제품 특징

  • CopperGREEN™ 은 Copper(I) ion검출에 높은 특이성을 나타냅니다. 다른 종류의 metal ion 또는 활성산소족(ROS) 과는 반응하지 않습니다.
  • High S/N: Copper (I) ion 과의 반응 전후 형광 시그널이 100배 이상 증가되어 노이즈를 최소화합니다.

■ 반응 메커니즘
CopperGREEN™ 은 본래 형광을 나타내지 않는 무색의 물질로 존재합니다. 세포 내의 Copper(I) 과 반응하여 킬레이트 작용을 일으키면 가수분해되어
형광빛을 나타내게 됩니다. 이 때 최대 excitation 파장은 ~480 nm 이며, 최대 emission 파장은 510 nm. 형광 시그널은 비가역적으로 이루어져 (부분적인) fixation 실험 후에도 남아있습니다.

Fig 1. CopperGREEN 과 여러가지 미량금속 간의 반응성 비교실험

[ROS 생성 조건]

  • H2O2: 300 µM H2O2
  • OCl: 300 µM NaOCl
  • OH: 20 µM Fe(ClO4)2, 200 µM H2O2
  • none: 0.05 M HEPES buffer (pH 7.2) as a control.

Fig 2. CopperGREEN™ 의 높은 S/N . (left) Cu(I)의 농도 및 반응 시간에 따른 스펙트럼. (right) Cu(I)와 CopperGREEN™ 의 반응은 1:1 의 molar ratio 조건에서 수행.

  • 실험 조건 : 5 μM CopperGREEN 이 포함된 배지에서 3시간 반응, 37 ℃ 5% CO2

■ Reference
Masayasu Taki, Shohei Iyoshi, Akio Ojida, Itaru Hamachi, Yukio Yamamoto
J. Am. Chem. Soc., 2010, 132, 5938–5939 doi: 10.1021/ja100714p

CupperGREEN

Code no. Product Name Target Cell permeability Size
GC 902 CopperGREEN Specific detection of CU1+ 50 nmolx5

CalFluor™ Series & MetalloFluor™ Series

Code no. Product Name Target Cell permeability Size
GC 5021 CaTM-2™ Red-fluorescent Ca2+ probe   50μg×5
GC 5041 CaTM-2™ AM Red-fluorescent Ca2+ probe 50μg×5
GC 4021 CaSiR-1™ Near-Infrared Ca2+ probe   50μg×10
GC 4031 CaSiR-1™ AM Near-Infrared Ca2+ probe 50μg×10
GC 901 FeRhoNox™-1 Specific detection of Fe2+ 50μg×10
SK2001-01 ZnAF-2 Specific detection of Zn2+   1mg
SK2001-02 ZnAF-2DA Specific detection of Zn2+ 1mg